一、原理
蛋白免疫印迹(Western Blot)是用抗体检测蛋白的重要方法之一。该方法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术现广泛应用于检测蛋白水平的表达。
Western Blot实验流程:
二、服务内容
1、 从人或动物组织样本、细胞样本提取蛋白样品;
2、 对蛋白样品进行定量分析;
3、 通过聚丙烯酰胺凝胶电泳,转膜,抗体孵育,信号收集对目的蛋白和内参蛋白表达水平进行检测,根据实验要求进行数据统计及分析。
三、 样本要求
组织>100mg;细胞>106个。样本收集及储存条件需严格按照标准操作。
四、最终提供结果
1、WB实验所有原始结果(包括蛋白样品浓度检测数据,保证蛋白浓度测定标准曲线R2>0.99、WB曝光原始图片)
2、详细的实验报告(包括实验原理,实验方法,仪器,试剂,灰度分析结果等)。
五、实验问题解决
六、本公司优势
1、本公司遵循实验过程透明,结果真实的原则,重点过程拍照记录,实验结果有迹可循;
2、本公司员工具有丰富的WB实验操作经验,确保您在最短的时间里得到最真实可靠的实验结果;
3、本公司具有丰富的磷酸化蛋白、组蛋白、药物处理后的细胞蛋白等检测技术经验,增加实验的成功率;
应用举例:
4、本公司可根据您的要求选择性提供化学曝光机曝光结果或暗室曝光结果;
5、对所用抗体做预实验进行抗体效果检测,评估实验风险告知客户;
6、本公司提供先进的仪器设备,保证实验操作顺利进行,不存在设备不好引起的实验误差
7、本公司拥有强大的技术支持团队作为后盾,提供实验操作、曝光结果的问题解惑,为您的科研道路保驾护航;